2.1.6 稳定性试验

取ZSP粉末2.0 g，测多测定成分精密称定，评法

按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，蒙药室温放置，扎冲中种分别于0、味丸2、测多测定成分4、评法6、蒙药8、扎冲中种10、味丸12、测多测定成分24 h按照“2.1.1”项下色谱条件进样，评法记录峰面积，蒙药没食子酸、扎冲中种绿原酸、味丸沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵峰面积的RSD值分别为0.14%、1.08%、0.22%、0.08%、0.72%、0.47%、1.84%、1.71%，表明该供试品溶液在室温下24 h内稳定。

2.1.7 重复性试验

取同一批次ZSP粉末（批号1908003）2.0 g，精密称定，按照“2.1.3”项下方法制备6份供试品溶液，按照“2.1.1”项下色谱条件进样，计算没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵峰面积的RSD值分别为0.06%、1.03%、0.19%、0.12%、0.29%、0.57%、1.86%、1.54%，表明该方法重复性良好。

2.1.8 加样回收率试验

取同一批次ZSP粉末（批号1908003）共6份，每份1.0 g，精密称定，置50 mL具塞锥形瓶中，精密量取质量浓度为1.66 mg/mL没食子酸、0.52 mg/mL绿原酸、0.97 mg/mL沉香四醇、0.67 mg/mL鞣花酸、1.74 mg/mL丁香酚、0.29 mg/mL β-细辛醚、0.26 mg/mL α-细辛脑、0.56 mg/mL甘草酸铵的混合对照品溶液1 mL，再按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件进样，记录峰面积，计算8种成分的加样回收率以及RSD值，结果显示，没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵的平均加样回收率分别为94.49%、100.43%、91.90%、94.66%、99.82%、95.85%、99.66%、97.34%，RSD值分别为0.45%、0.42%、0.26%、0.64%、0.60%、1.37%、0.78%、1.95%，表明该方法具有良好的回收率。

2.2 相对校正因子（fs/i）的确定及耐用性考察

2.2.1 fs/i的测定

取“2.1.2”项下混合对照品溶液进样分析，记录各成分的峰面积，以丁香酚为内参物，取多个质量点计算所得的fs/i，取平均值作为定量用fs/i［fs/i＝fs/fi＝AsCi/ AiCs，其中As为丁香酚对照品的峰面积，Cs为丁香酚对照品的质量浓度，Ai为待测成分的峰面积，Ci为待测成分的质量浓度］。计算待测组分没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵的fs/i，结果见表2。结果显示，没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵与内参物丁香酚之间的fs/i分别为0.433 4、1.068 3、0.505 6、0.141 6、0.429 0、0.346 2、1.748 8，RSD值分别

为0.77%、0.40%、0.90%、0.82%、0.61%、1.42%、1.69%。

2.2.2 不同色谱仪器和色谱柱对fs/i的影响

本实验考察了Agilent 1260高效液相色谱仪器（美国）和LC-20A（20A）高效液相色谱仪（日本岛津）对fs/i的影响，Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Inertsil ODS-3柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、BDS HypersilTM C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）对fs/i的影响，结果见表3。结果显示，2台色谱仪器和3根色谱柱测得各待测成分fs/i的RSD均小于2.0%，表明fs/i在不同色谱仪器和色谱柱下具有良好的耐用性。

2.2.3 不同柱温对fs/i的影响

本实验考察了不同柱温（25、30、35、40 ℃）对fs/i的影响，结果见表4。结果显示，在不同柱温测得各待测成分fs/i的RSD均小于2%，表明fs/i在柱温有波动时具有良好的耐用性。

相关链接：色谱，丁香酚，绿原酸

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